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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

超快轉(zhuǎn)膜液使用獨(dú)特配方，能高效超快地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）或半干轉(zhuǎn)法（Semi-dry blot）都可以使用。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

快速高效：分子量100kD以下蛋白只需轉(zhuǎn)膜30-40分鐘。與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液相比，發(fā)熱量更低。
兼容性好：超快轉(zhuǎn)膜液能兼容LaemmLi膠，預(yù)制膠，Bis-Tris膠等多種凝膠。
轉(zhuǎn)移效率高：超快轉(zhuǎn)膜液對(duì)分子量跨度較大的蛋白也有很好的轉(zhuǎn)移效率，有效的解決了大小蛋白不能在同一張膜上同時(shí)轉(zhuǎn)移的問題。

使用說明

轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備：5-6張裁好的濾紙：裁好的轉(zhuǎn)印膜；足夠的1×超快轉(zhuǎn)移buffer。

一、濕轉(zhuǎn)法（Tank blot）

1、配制1×超快轉(zhuǎn)膜液

1升1×Western超快轉(zhuǎn)膜液：取50ml 20×超快轉(zhuǎn)膜液，加入750ml雙蒸水，混勻后加入200ml甲醇，混勻即可，現(xiàn)配現(xiàn)用，配好后置于冰上存放）。

2、將濾紙和海綿浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中（注意：在使用6%或8%分離膠轉(zhuǎn)移大分子蛋白時(shí)，應(yīng)該降低甲醇含量至10%，以獲得更好轉(zhuǎn)移效果）。

注意：1、要徹底清除三明治結(jié)構(gòu)中的氣泡，適當(dāng)補(bǔ)加1×超快轉(zhuǎn)膜液保持三明治結(jié)構(gòu)濕潤(rùn)。

2、PVDF膜使用前要用無水甲醇潤(rùn)濕30秒。

3、三明治結(jié)構(gòu)的制作不能太緊，也不能太松。太緊和太松都會(huì)影響轉(zhuǎn)印效果。如果太緊的話，可以去除陽(yáng)極一側(cè)的海綿或?yàn)V紙。

5、將三明治結(jié)構(gòu)放于轉(zhuǎn)移槽中。

  1、按照下表配制1×超快轉(zhuǎn)膜液

2、將濾紙浸泡在1×超快轉(zhuǎn)膜液中，完全浸濕。

3、將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘，去除膠表面的SDS；隨后將凝膠浸泡在1×超快

轉(zhuǎn)膜液中。

注意：水中漂洗時(shí)間一定不能超過2分鐘，否則分子量較大的蛋白不能完全轉(zhuǎn)移。

半干轉(zhuǎn)時(shí)，濾紙、膠、膜之間的大小，一般是下層濾紙≥膜≥膠≥上層濾紙。上下兩層的濾紙一定不能接觸；濾紙、膠、膜之間千萬不能有氣泡。接觸的濾紙和氣泡會(huì)造成短路。

注意：PVDF膜使用前需用無水甲醇潤(rùn)濕30秒。

三、轉(zhuǎn)移條件

1、濕轉(zhuǎn)

 推薦使用恒流轉(zhuǎn)移，電流可設(shè)置350-400mA，轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，可以承受大電流，并且發(fā)熱量較低。

注：不推薦使用恒壓轉(zhuǎn)移，因轉(zhuǎn)膜液中離子成分較多，當(dāng)電壓在100v左右時(shí)，電流會(huì)達(dá)到400mA，此時(shí)已達(dá)到普通電泳儀器zui大電流，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，可能無法達(dá)到穩(wěn)定的100v電壓。

2、半干轉(zhuǎn)

保存：常溫保存，有效期兩年。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。