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Collagen, Type I, from Rat Tail鼠尾I型膠原蛋白
| 貨號 | J1238 | 售價（元） | 2250 |
| 規(guī)格 | 10ml (50mg) | CAS號 |
- 產品簡介
- 相關產品
產品信息
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貨號 |
產品名稱 |
規(guī)格 |
價格 |
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J1216 |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾I型膠原蛋白 |
2ml (10mg) |
600 |
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J1238 |
Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾I型膠原蛋白 |
10ml (50mg) |
2250 |
沃博生物的鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備，純度達到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng)；也可用于制備三維膠原凝膠，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。
產品性質
中文別名：鼠尾膠原蛋白Ⅰ型
英文別名：Rat tail tendon collagen type
外觀（Appearance）：白色粉末
溶解性（Solubility）：溶解于0.006mol/L乙酸 5mg/ml
優(yōu)勢特點
無塵車間內生產，保證潔凈度
可用于包被細胞培養(yǎng)器皿(單分子層包被)
也可形成具有一定強度的三維膠用于細胞的三維空間培養(yǎng)
通過細胞培養(yǎng)測試(包括三維膠內的細胞培養(yǎng))
電泳結果和 Sigma 的同類產品無顯著區(qū)別
產品為無菌的溶液，省去從干粉配制的麻煩
圖示案例
圖1：沃博生物的鼠尾膠原蛋白包被的
培養(yǎng)皿中生長的 PC-12 細胞
圖2：沃博生物的鼠尾膠原蛋白三維膠中
生長的 NIH-3T3 細胞（接種后 5天）
圖3：Sigma鼠尾膠原蛋白(貨號： C7661)
SDS-PAGE 電泳對比。
A: Sigma B：warbio
實驗步驟參考
1、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被 推薦濃度： 1-5ug/cm2
以包被濃度為 2 ug/cm2 為例
用無菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/ml。按表 (一)體積加到相應的培養(yǎng)器皿中
確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面，開蓋在超凈臺上過夜晾干。 也可以在室溫放置 1小時后，用PBS洗3-4次后直接使用。
按表 (一)體積加到相應的培養(yǎng)器皿中：
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培養(yǎng)皿類型 |
表面積(cm2 ,每孔或每皿) |
加入 0.012mg/ml 膠原的體積 ( ul ) |
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96孔細胞培養(yǎng)板 |
0.3 |
50 |
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24孔細胞培養(yǎng)板 |
1.9 |
300 |
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12孔細胞培養(yǎng)板 |
3.8 |
600 |
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6孔細胞培養(yǎng)板 |
9.5 |
1580 |
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35mm細胞培養(yǎng)皿 |
8 |
1330 |
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60mm細胞培養(yǎng)皿 |
21 |
3500 |
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100mm細胞培養(yǎng)皿 |
55 |
9170 |
包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3個月以上的時間。
2、三維膠原的制備
沃博生物的鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。沃博膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。
需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水
A．不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul沃博生物鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入100ul 10xPBS或10x培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后，轉移到培養(yǎng)箱內。如果配制中使用的是10xPBS，使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。
B．含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul沃博生物鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23ul 10xPBS或10x培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液，轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注：鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫。
1 、 Birkedal-Hansen, H. 1987. Catabolism and turnover of collagens: Collagenases. Methods Enzymol. 144 : 140-171.
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注意事項
1、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2、鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫。
3 、整個操作請在無菌環(huán)境下無菌操作，避免污染以影響細胞生長。
運輸與保存方法
冰袋運輸。4℃保存，有效期1年。不可凍存。